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液相色譜儀的分離系統(tǒng)由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。一、色譜柱:液相色譜儀的色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成,柱內(nèi)徑為1~4mm,柱長(zhǎng)為10~50cm,柱形多為直形,內(nèi)部充滿(mǎn)微粒固定相。近年來(lái),由于高性能填充劑的細(xì)?;?~5um微粒填料的使用,趨向柱內(nèi)徑為...
制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質(zhì)。為了縮短分離時(shí)間和提高分離效率,制備型液相色譜的的進(jìn)樣品量很大,導(dǎo)致色譜柱的分離負(fù)荷相應(yīng)加大,因此必須加大色譜柱填料,增大柱內(nèi)徑和柱長(zhǎng),使用的流動(dòng)相相對(duì)增多。然而,當(dāng)色譜柱上的樣品負(fù)載加大時(shí),往往會(huì)導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純產(chǎn)品。制備型液相色譜要解決容量與柱效之間的矛盾,對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來(lái)說(shuō),要少用填料,少用溶劑,盡可能多的得到產(chǎn)品。一、樣品的前處理:制備型液相色譜柱分離的樣品多,比分析型液相色譜柱更容易受污染,樣品...
液相色譜技術(shù)自發(fā)明以來(lái),由于其高效、高靈敏度等特點(diǎn),得到了飛速發(fā)展。近年來(lái),伴隨著生物技術(shù)和精細(xì)化工的發(fā)展,作為液相色譜分支的制備液相色譜也日益受到重視,成為了生物技術(shù)產(chǎn)品和研究中*的手段。分析色譜與制備色譜的根本區(qū)別在于分離目的不同。分析色譜,反映的是樣品的組成,追求的是高效分離和高靈敏度,不需要收集特定的餾分,洗脫液通常作為廢液來(lái)處理。但在制備色譜中,為了節(jié)省投資和操作費(fèi)用,必須以最少的時(shí)間生產(chǎn)最大量的產(chǎn)品。由于目的不同,制備色譜與分析色譜所選用的操作參數(shù),包括色譜柱尺寸...
HPLC過(guò)程中影響待測(cè)組分遷移的因素較多,同一組分在不同色譜條件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作條件下,同一組分在不同色譜柱上的保留值也可能有很大差別。因此,在高效液相色譜分析過(guò)程中,對(duì)定性分析方法提出了更高的要求。(1)利用檢測(cè)器的選擇性進(jìn)行定性將經(jīng)色譜柱分離后的樣品引入并聯(lián)或串聯(lián)的幾種不同檢測(cè)器,根據(jù)它們不同的檢測(cè)性能,視其出峰情況可以初步判別出未知化合物的具體類(lèi)別。(2)反相色譜中的“a、C”指數(shù)定性在以硅膠為固定相的反相色譜中,待測(cè)組分保留值與流動(dòng)相組成關(guān)系式...
高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),最后通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜跑梯度如何平衡基...
液相色譜儀(LiquidChromatography)是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域。液相色譜儀的樣品預(yù)處理方法:1、過(guò)濾、離心:常用的濾膜材質(zhì)有纖維素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺應(yīng)用較廣。2、加速溶劑萃?。杭铀偃軇┹腿∈窃谔岣邷囟龋?0~200℃)和壓力(...
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